کلونینگ و تولید فرم مونومر استرپتاویدین نوترکیب و ارزیابی اتصال آن به بیوتین
نویسندگان
چکیده مقاله:
هدف: استرپتاویدین پروتئینی هموتترامر است که تمایل اتصال بالای آن به بیوتین باعث شده در فرآیندهای بیوتکنولوژی و مطالعات سلولی کاربرد فراوانی داشته باشد. اما فرم تترامر آن در بعضی تداخل ایجاد می‌کند. بنابراین در این مطالعه با ایجاد جهش حذفی اقدام به تولید فرم مونومر استرپتاویدین گردید. مواد و روش‌ها: ابتدا توالی نوکلئوتیدی استرپتاویدین از سایت NCBI گرفته شد و بعد از اعمال جهش در توالی ژن مورد نظر به منظور بیان در باکتری E.coli بهینه و سنتز گردید. برای کلون کردن ژن از سویه E.coli DH5α و برای بیان ژن استرپتاویدین از سویه E.coli BL21 (DE3) pLysS استفاده شد. تخلیص پروتئین با کیت Ni-NTA انجام شد و توسط HABA dye تمایل اتصال استرپتاویدین به بیوتین مورد سنجش قرار گرفت. یافته‌ها: فرم مونومر استرپتاویدین در میزبان بیانی E.coli BL21 (DE3) pLysS تولید و تخلیص گردید. استرپتاویدین مونومر نوترکیب دارای تمایل اتصال مناسب به بیوتین بود. نتیجه‌گیری: با ایجاد جهش در توالی پپتیدی استرپتاویدین می‌توان به فرم مونومر آن دست یافت که دارای تمایل اتصال مناسب به بیوتین باشد.
منابع مشابه
مقایسه تأثیر وضعیت طاق باز و دمر بر وضعیت تنفسی نوزادان نارس مبتلا به سندرم دیسترس تنفسی حاد تحت درمان با پروتکل Insure
کچ ی هد پ ی ش مز ی هن ه و فد : ساسا د مردنس رد نامرد ي سفنت سرتس ي ظنت نادازون داح ي سکا لدابت م ي و نژ د ي سکا ي د هدوب نبرک تسا طسوت هک کبس اـه ي ناـمرد ي فلتخم ي هلمجزا لکتورپ INSURE ماجنا م ي دوش ا اذل . ي هعلاطم ن فدهاب اقم ي هس عضو ي ت اه ي ندب ي عضو رب رمد و زاب قاط ي سفنت ت ي هـب لاتـبم سراـن نادازون ردنس د م ي سفنت سرتس ي لکتورپ اب نامرد تحت داح INSURE ماجنا درگ ...
متن کاملکلونینگ و تولید نوترکیب آنزیم گرانزیم M انسانی
Background and Objective: Granzyme M is a member of a granule serine proteases family, which is mainly expressed by cytotoxic T lymphocytes and natural killer cells. Granzyme M appears to be a potent inducer of tumor cell apoptosis. With respect to the importance of Granzyme M in the apoptosis, the aim of this work was the production of the biologically active enzyme. Materials and Methods: ...
متن کاملکلونینگ، بیان و تخلیص پروتئین نوترکیب زیرواحد بتای هورمون TSH انسانی (TSHβ) و ارزیابی آنتیژنیسیته آن
Background and purpose: Measurement of thyroid stimulating hormone (TSH), usually through RIA and ELISA tests, is very useful for the diagnosis of thyroid disorders. Considering the structural similarity between alpha chain of TSH and the three glycoprotein hormones of luteinizing hormone, follicle stimulating hormone, and chorionic gonadotropin (CG), in this study, we aimed to examine the prod...
متن کاملکلونینگ، بیان، خالص سازی و ارزیابی آنزیم لیزواستافین نوترکیب با استفاده از سیستم کلونینگ pBAD
Background and purpose: Staphylococcus aureus is an important nosocomial pathogen which causes some diseases such as endocarditis, osteomyelitis, pneumonia, toxic shock syndrome, and food poisoning. The excessive and inappropriate use of antibiotics in the treatment of these diseases causes resistance to many antibiotics. Lysostaphin is an effective agent in the treatment of staphylococcal infe...
متن کاملکلونینگ و تولید نوترکیب آنزیم گرانزیم m انسانی
زمینه و هدف: گرانزیم m یکی از اعضای خانواده ی سرین پروتئازهاست که درلنفوسیت های t سیتوتوکسیک و سلول های nk بیان می شود. گرانزیم m یک القاکننده ی آپوپتوز در سلول های توموری هدف می باشد. بنابراین با توجه به اهمیت گرانزیم m در آپوپتوز، هدف از این تحقیق تولید آنزیم فعال به لحاظ زیستی می باشد . روش بررسی: قطعهcdna مربوط به گرانزیم m فعال به درون ناقل بیانی pet21a(+) کلون و ناقل نوترکیب جهت بیان پروت...
متن کاملکلونینگ، بیان و تخلیص پروتئین نوترکیب زیرواحد بتای هورمون tsh انسانی (tshβ) و ارزیابی آنتیژنیسیته آن
سابقه و هدف: اندازه گیری هورمون متحرک تیروئید (tsh) برای تشخیص و بررسی اختلالات تیروئیدی، بسیار مفید بوده و معمولا از آزمون های ria و elisa برای این منظور می شود. با توجه به اینکه زنجیره آلفا بین tsh و سه هورمون گلیکوپروتئینی lh, fsh و cg شباهت ساختمانی زیادی وجود دارد؛ بنابراین، در پژوهش حاضر سعی بر آن است که زیر واحد بتا tsh، تولید شده و از نظر آنتی ژنیسته مورد بررسی قرار می گیرد. مواد و روش ...
متن کاملمنابع من
با ذخیره ی این منبع در منابع من، دسترسی به آن را برای استفاده های بعدی آسان تر کنید
ذخیره در منابع من قبلا به منابع من ذحیره شده{@ msg_add @}
عنوان ژورنال
دوره 20 شماره 1
صفحات 115- 121
تاریخ انتشار 2018-01
با دنبال کردن یک ژورنال هنگامی که شماره جدید این ژورنال منتشر می شود به شما از طریق ایمیل اطلاع داده می شود.
کلمات کلیدی برای این مقاله ارائه نشده است
میزبانی شده توسط پلتفرم ابری doprax.com
copyright © 2015-2023